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紫外分光光度計如何選擇合適的波長進行測量？

更新時間：2024-08-09   點擊次數：2240次
選擇紫外分光光度計合適的測量波長，主要考慮以下幾個方面：


  1. 物質的特征吸收峰

    • 查閱相關的化學和生物學文獻，了解待測物質在紫外-可見光區域的特征吸收波長。

    • 許多物質在特定波長下具有最大吸收，選擇該波長能獲準確的測量結果。例如，DNA 在 260nm 處有明顯的吸收峰。

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  2. 避免干擾

    • 考慮樣品中可能存在的其他物質的吸收情況，選擇波長時要盡量避開這些干擾物質的吸收峰，以確保測量的準確性。

    • 比如在復雜的混合物中，如果兩種成分的吸收峰較為接近，應選擇吸收差異較大的波長進行測量。

  3. 實驗目的和方法要求

    • 遵循特定實驗方法或標準操作流程中推薦的測量波長。

    • 如果是為了與已有的研究結果進行比較，應采用相同的波長。

  4. 波長掃描

    • 對于不明確吸收波長的物質，可以先進行波長掃描。

    • 即讓儀器在一定波長范圍內連續測量吸光度，從而確定待測物質的最佳吸收波長。

  5. 儀器性能

    • 考慮所使用的紫外分光光度計在不同波長下的性能，如靈敏度、穩定性和噪聲水平。

    • 某些儀器在特定波長范圍內可能具有更好的測量精度。

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例如，在測定維生素 C 含量時，通常選擇 245nm 作為測量波長，因為維生素 C 在這個波長處有較強的特征吸收，且能有效避免其他常見物質的干擾。